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microRNA實驗85折促銷(microRNA靶基因驗證,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)

microRNA實驗85折促銷(microRNA靶基因驗證,定量PCR,microRNA-Seq,microRNA靶基因分析)
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                          做microRNA報告基因實驗免費贈送生物信息學服務!

                                                   microRNA定量PCR 40元/孔!
                                                    microRNA-Seq  4500元/樣本(10M reads)!

    
    英拜生物可為您提供microRNA生物信息學分析到報告基因載體構建、檢測服務整套服務,可加速科研人員對microRNA的功能研究。深入的生物信息學分析不僅可以為microRNA功能研究指引方向,也是解析microRNA調控網絡的必備利器。
本公司采用 的psiCHECK-2報告基因載體,具有多克隆位點,方便插入目的靶點序列,用于終點法的細胞裂解物檢測,包含螢火蟲熒光素酶基因,使海腎熒光素酶的表達水平歸一化,所以無須通過共轉染進行歸一化,令該系統更可靠、重現性更好。本公司專業技術服務人員就可替您完成載體構建,為您節省大量的時間和精力。


英拜生物microRNA報告基因實驗流程:
1.microRNA靶點的預測
利用Targetscan,miRanda,Microcosm,Pita等軟件得到目的microRNA的預測靶點序列(客戶提供或由我公司預測)。
2.獲得microRNA靶點序列
根據提供的靶序列,合成兩條互補的單鏈DNA模板。或者,設計引物PCR擴增目的microRNA靶基因3’UTR序列。
3.microRNA靶序列克隆
將合成的兩條單鏈退火成雙鏈(具有粘性末端),或將PCR產物雙酶切,后連入經過同樣雙酶切的psicheck報告基因載體中,連接產物轉化大腸桿菌DH5α。
4.陽性克隆鑒定。
挑選轉化的菌落,雙酶切鑒定陽性克隆,并測序驗證克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.細胞轉染準備
將含目的microRNA靶基因的psicheck報告基因載體和microRNA mimics或microRNA negative control共轉染293T或Hela細胞。
6.熒光素酶檢測
共轉染細胞24-72h后,進行雙熒光素酶檢測。
7.整理分析數據,得出結論。
提供有microRNA靶序列的報告質粒一份,甘油保存菌株各一支。附實驗報告,包括載體構建過程,鑒定記錄,測序報告,細胞轉染,熒光檢測。


在本公司做microRNA靶基因報告基因實驗,可以享受a-f中一項免費生物信息學服務:

a)差異表達microRNA的篩選和聚類分析
b)microRNA靶基因預測
c)microRNA與靶標基因的調控網絡構建
d)microRNA與編碼蛋白基因共轉錄預測
e)microRNA與GO的調控網絡構建
f)microRNA與KEGG Pathway的調控網絡構建
g)microRNA甲基化位點預測
h)microRNA轉錄因子結合位點預測
i)microRNA與轉錄因子相互調控網絡構建
j)轉錄因子與microRNA靶標基因調控網絡構建
k)microRNA 、轉錄因子與靶標基因三者復雜調控網絡構建

   




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